TurboNuclease内切核酸酶
产品名称: TurboNuclease内切核酸酶
英文名称: TurboNuclease
产品编号: N0103M
产品价格: 0
产品产地: USA
品牌商标: Accelagen
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使用范围: null
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描述
TurboNuclease是用E.coli表达、通过专利纯化过程制得超纯级的重组粘质沙雷氏菌的细胞外内切核酸酶。TurboNuclease是高纯度的同源二聚体,由2个27kDa亚基组成,具有非常高的比活力,且无蛋白酶活性。它能把单链及双链核酸(DNA或RNA)非特异地水解成1到4个碱基的5’-单磷酸末端寡核苷酸。
应用
1.在蛋白纯化及样品制备过程中,能够有效降低粘稠度;
2.在病毒疫苗、病毒载体(如腺病毒、AAV等)及溶瘤病毒等制备过程中,去除核酸污染;
3.在蛋白电泳(SDS-PAGE)、2D电泳过程中,能减少条带拖尾现象;
4.在PBMC解冻、类器官处理中,能减少或阻止细胞聚团;
5.在绝大多数应用中,TurboNuclease能够替代粗提的DNase I。
优势
1.与竞品的重组粘质沙雷氏菌的细胞外内切核酸酶相比,TurboNuclease能耐受更高的盐浓度、具有更宽的最适pH范围;
2.与Benzonase相比,TurboNuclease有更宽的适合pH范围;
3.昆虫表达系统中,pH低于6.5,与其他核酸酶相比,TurboNuclease酶活更高;
4.能耐受500mM盐浓度,——在500 mM NaCl条件下起作用,但酶活会有所降低。
酶活定义
在37℃,pH 8.0,50 mM Tris-HCl及1 mM MgCl2反应体系中,一个单位的TurboNuclease酶在30分钟内可将鲑鱼精子DNA消化成1.0 OD260的酸可溶寡核苷酸;等同于将50µg的鲑鱼精子DNA完全消化成寡核苷酸。
酶活性和特异性
TurboNuclease比活力为>1.3x106 units/mg,相当于>3x106 Kunitz units/mg,是高纯度牛DNase I比活力(约为25,000 Kunitz units/mg)的100倍以上。
TurboNuclease和Benzonase有相似的比活力。TurboNuclease无可检测的蛋白酶活性。
组分及参数
TurboNuclease保存液是50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 50 mM NaCl, 5 mM MgCl2,及50% Glycerol。
通过Accelagen的专利纯化工艺制得,纯度达到99%以上;
内毒素<0.1 EU/1000units,由Charles River的Endosafe PTS LAL检测得到。
储存条件
建议储存在-20℃,稳定保存2年以上。37℃条件下在保存液中至少稳定3周,而不影响活性。
使用建议
1.为了降低细胞裂解液粘稠度,建议加入10-100 U/g细胞量,4℃孵育10-30分钟;
2.在AAV纯化过程中,推荐 5 – 50 U/ml的酶用量,37℃孵育1-2小时。
缓冲体系、细胞类型及细胞裂解方法等,都会影响最终的消化效果。TurboNuclease比活力极高,细胞裂解液中低于1µl/ml的用量,并不影响任何下游实验。